PCR和实时荧光定量PCR机区别与应用场景

介绍

在现代生物技术中，分子生物学实验是研究生命科学的重要手段之一。其中，聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）技术因其高效、快速且灵敏等特点而广泛被用于基因克隆、病原体检测、遗传物质分析等多个领域。随着技术的不断进步，一些新的PCR变种如实时荧光定量PCR机也应运而生，它们能够提供更为精确和高效的数据收集。

聚合酶链反应（PCR）的基本原理

聚合酶链反应是一种能够能够将特定的DNA序列复制成数十亿倍的分子生物学方法。这项技术通过使用一系列特殊设计的小RNA片段——引物以及一种能够复制DNA模板并连接新形成的扩增产物的小型DNA聚合酶——Taq聚合酶来实现。在每一个循环中，这两类小RNA片段会结合到目标区域，并由Taq聚合酶将它们连接起来，从而形成新的完整DNA双螺旋结构。经过多次循环后，即可获得大量相似的目标区域。

实时荧光定量PCR机简介

与传统的末端产品扩增（Endpoint PCR）不同，实时荧光定量PCR可以在整个扩增过程中连续监测样本中的目的基因含量变化，而不是仅在最后一次循环结束后进行测定。这种方式不仅提高了实验速度，还减少了操作误差，同时提供了更为准确的结果。

实时荧光定量PCR机与传统PCRs比较

首先，在实际操作上，实时荧光定量仪器比传统PCRs简单易用，因为它自动监控整个反应过程，不需要人工干预。此外，由于其具有内置探针系统，可以直接检测引物之间或引物与标记探针之间形成的一对碱基互补配对，使得检测结果更加迅速和准确。而对于一些需要较长时间进行扩张的大规模样本测试来说，可采用热水浴加热设备，但这通常要求更多的人力参与管理温度控制。

应用场景分析

疾病诊断：利用特异性引物和探针，可以快速、高度精确地检测各种微生物，如细菌、病毒甚至是某些癌症相关基因。

基因表达分析：追踪特定的转录事件变化，是研究细胞信号通路、药物作用及疾病发展的一个重要工具。

遗传工程：用于克隆大片段 DNA 或构建重组载体，对于基础研究以及工业生产都有极大的帮助。

环境监测：通过从环境样本中提取和鉴定微生物，将有助于了解污染源及其影响范围。

结论

总结来说，虽然两者都是现代分子生物学实验室不可或缺的设备，但根据具体需求选择适当的手段至关重要。在选择仪器设备的时候，应当考虑所需完成任务是否涉及到快速、高度精确性的需求，以及成本效益问题。如果你需要频繁执行相同类型的大规模同源核苷酸序列检出，那么投资购买一台实时荧光定量仪可能是个明智之举。但如果你的工作主要集中在低成本、小批次试验上，则普通型PCRs已经足以满足你的需求。因此，在决定购置哪种类型仪器之前，要详细考虑自己的实验需求，并参考专业人员关于“生物实验室仪器设备一览表”的建议进行决策。